Câu hỏi/bài tập:
Em hãy đề xuất một quy trình tách chiết RNA, biết rằng trong khi enzyme ribonuclease (như Rnase A) phân huỷ đặc hiệu RNA thì enzyme deoxyribonuclease (như Dnase I) phân huỷ đặc hiệu DNA. Kiểm chứng giả thuyết bằng cách tìm kiếm “Quy trình tách chiết RNA” trên mạng internet.
Học sinh tự đề xuất.
- Quy trình:
Advertisements (Quảng cáo)
+ Phá vỡ màng tế bào: sử dụng chất tẩy rửa SDS để phá vỡ màng tế bào và giải phóng RNA
+ Ức chế Rnase: Thêm chất ức chế hoặc sử dụng nước đã xử lý bằng DEPC để ngăn chặn hoạt động của Rnase, đảm bảo RNA không bị phân huỷ.
+ Loại bỏ protein và DNA: sử dụng hỗn hợp dung môi như Trizol để tách RNA ra khỏi protein và DNA.
+ Tách và tủa RNA: Ly tâm mẫu tách RNA ra khỏi các tạp chất khác, sau đó sử dụng isopropanol để tủa RNA và rửa lại bằng ethanol.
+ Thu hồi và bảo quản RNA: thu hồi RNA tinh khiết và bảo quản ở nhiệt độ thấp.